用引物设计软件，如PRIMER5 、primerselect等看看引物或者其反向互补序列是否可以与模板序列完全匹配。Tm值是否合适，有没有错配，发卡结构以及形成二聚体等。比较懒一点的就是用primer5，rating分数在90以上的一般没有问题
