从脾脏分离淋巴细胞用什么试剂盒

有专门的动物脾脏淋巴细胞分离液试剂盒。

一般试剂盒组成：

全血及组织稀释液            100ml

细胞洗涤液                        100ml

试剂C                                 100ml

试剂F                                  100ml

说明书                                1 份

【检验方法】

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。

1. 首先制备脾脏组织单细胞悬液，制备方法详见“脾脏组织单细胞悬液制备技术”。

2. 取一支 15ml 离心管，加入与脾脏组织单细胞悬液等量的分离液（注：分离液最少不得少于 3ml）。

3. 用吸管小心吸取脾脏组织单细胞悬液加于分离液液面上，400-500g，离心 20-30min。（注：根据脾脏组织单细胞悬液量确定离心条件，脾脏组织单细胞悬液量越大，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。

4. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为稀释液层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。

5. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一 15ml 离心管中，向离心管中加入10ml 清洗液混匀细胞。

6. 250g，离心 10min。

7. 弃上清。

8. 用吸管以 5ml 清洗液重悬所得细胞。

9. 250g，离心 10min。

10. 重复 7、8、9，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。