体外诱导ES细胞的原理:在体胚胎分化过程中,组织发生和身体构造 的形成具有时空顺序性和相互诱导性。在个体发 育过程中,细胞分化是程序控制的有序有规律过 程,程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组 织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方 式和不同的生理功能。从分子水平上来看,这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异。这种基 因表达差异除由细胞内在发育程序决定外,还受 细胞外环境影响和调控,且有时这种外部控制条 件或环境对形成特定细胞有着决定性作用。ES细 胞体外定向诱导分化的原理,就是选择适当的诱 导剂和诱导模式,通过诱导物与细胞表面受体结 合或使细胞发生轻度可逆性损伤等,使被诱导细 胞按预定的细胞类型方向分化,然后将这些定 向分化的细胞进行分离和培养传代,从而得到人 们所需要的细胞类型。
ES细胞在体外的培 养过程中,能够在有饲养层细胞或者分化抑制因 子(DIA),白血病抑制因子(LIF)等存在的条件下 维持其未分化状态,保持发育全能性,可以无限增 值,但一旦除去饲养层细胞,除去这些抑制分化因 子,或者添加一些诱导分化因子(如维甲酸RA、神 经生长因子NGF)等,就会向各类可能的细胞发生 定向分化。在ES细胞的诱导过程中,不同的诱导 方式所得到的分化细胞的种类和数量不同;相同 的诱导方式,不同的培养状态其分化行为也不相 同。目前,已从ES细胞诱导出神经细胞、心肌细 胞、血细胞、血管细胞、脂肪细胞、肝细胞、骨细胞 和胰岛素分泌细胞等。