梅毒的诊断主要依据病史、临床表现、实验室检查来诊断。询问病史极为重要,包括不洁性接触史、性伴侣情况、既往性病史、现病史、婚姻史、分娩史等,如为胎传梅毒,还应询问双亲的性病史及家庭其他成员受染情况。临床检查应系统、全面,必要时需请有关专科协助检查。诊断梅毒的实验室检查主要有梅毒螺旋体暗视野检查和梅毒血清学检查。非梅毒螺旋体抗原血清试验用于观察疗效,判定复发及再感染。梅毒螺旋体抗原血清试验用于确诊梅毒,经过正规的驱梅治疗,这类血清反应仍保持阳性,不能用于疗效及随访结果评估。梅毒经足量规则治疗后,应定期随访观察,包括全身体检和复查非梅毒螺旋体抗原血清学试验滴度。早期梅毒,随访2~3年,第1次治疗后每隔3个月复查一次,1年后每半年复查一次。晚期梅毒需随访3年或更长,第1年每3个月一次,以后每半年一次。心血管梅毒及神经梅毒需随访3年或更长,除定期作血清学检查外,还应同时由专科医师合作进行终生随访,根据临床症状进行相应处理。少数患者在正规抗梅治疗后,非梅毒螺旋体抗体滴度下降至一定程度即不再下降,且长期维持(甚至终身),即为血清固定现象。血清固定的机制尚不清楚,对血清固定者应进行全面体检,包括HIV检测、心血管系统、神经系统和脑脊液检查,以早期发现无症状神经梅毒或心血管梅毒。